被准许。自九月到京，十二月又出兵屯襄国。诏百官饯行，马援对黄门郎梁松、窦固说：“凡人成显贵，也要能成贫贱，如果你们不能再贫贱，处在高位上要能自持自控，我劝你们想到我的嘱咐。”梁松后来果然以过贵遭灾，窦固也差点不免。

第二年(45)秋，马援就率三千骑出高柳，行雁门、代郡、上谷等边塞。乌桓探马见汉军到，便逃散了，马援无所得而回。马援曾经卧病，梁松来问候，拜见于床下，马援不答礼。梁松去后，儿子们问道“：梁松是帝的女婿，贵重朝廷，公卿以下莫不害怕，大人为何独不答礼他？”马援说“：我是梁公父亲的朋友，虽贵，怎能失掉长幼的辈份呢？”松由此恨马援。二十四年(48)，武威将军刘尚击武陵五溪蛮夷，深入，军队遭到覆灭，马援因此又请求出兵。马援这时已六十二岁，帝怜他年老，不同意。马援自请说：“臣还能披甲上马。”帝令他试试。马援在马上据着马鞍左顾右盼，以表明可用。帝笑着说“：这个老头好健康啊！”于是派遣马援率领中郎将马武、耿舒、刘匡、孙永等。率领从十二个郡招募来的士兵及解除枷锁的刑徒四万多人征五溪。马援夜间与送行的人诀别，告友人谒者杜谙说“：我受厚恩，年龄紧迫余日已经不多，时常以不能死于国事而恐惧，现在获得出征机会，死了也心甘瞑目，害怕的是一些长者家儿或在左右，或参与后事，特别难以调遣，我独为此耿耿于心啊。”

第二年(49)春，军到临乡，遇贼攻县城，马援往迎击，破贼，斩获二千余人，贼都分散走入到竹林中去了。起初，军抵下隽，有两条路可进入，一条从壶头进入路近但水险，一条从充县进入路宽敞安全但运输路程远，帝开始有点怀疑。等到军到，耿舒要从充县而入，马援以为路远拖延时间长而费粮多，不如从壶头进，扼其咽喉，充贼自破。以此奏帝，帝从马援策。三月，进军壶头。贼乘高扼守险隘，因水流过速，船不能上。恰逢酷暑，士卒多患病而死，马援自己也患了病，于是受困，就在河岸凿洞为室，以避酷暑。贼每每升到险处击鼓叫喊，马援常拖着病腿去察看，左右被他这种壮志所感动，莫不为之流涕。耿舒与兄好。。侯耿。。书信说“：前次我上书建议当先进攻充县，粮虽难运而兵马得以展开使用，军人数万争先奋进。今困在壶头不得进，大众忧郁将死，实可痛惜。前次到临乡，贼无故自己到来，当时如果乘夜攻击，就可消灭掉。伏波用兵像西域的贾胡，到一处后就止步不前，因此失利。今果然困于疾疫，都如我所预言的一样。”好。。侯。。得书，奏于帝，帝就派虎贲中郎将梁松从驿道责问马援，且代为监军。恰逢马援病逝，梁松因以前看望马援疾病时马援不答礼而怀恨在心，于是借机陷害马援。帝大怒，追收马援的新息侯印绶。起初，马援兄之子马严、马敦都喜欢讥议时事，而与侠客们轻相交往。马援以前在交阝止，写信回家训诫道：“我想你们听到人家过失，要像听父母之名一样，耳可以听到，口不可说啊。喜欢议论人的长短，乱讥刺时政，这是我最厌恶的，我是宁肯死也不愿听到子孙们有这种行为的。你们知道我非常厌恶此事，我之所以要再次讲到此事要像男女婚嫁时施衿结衤离一样，申明父母的训诫，要使你们牢记不忘。龙伯高敦厚周到谨慎，口无异言，谦约节俭，清廉公正有威望，我很爱他敬重他，愿你们向他学习。杜季良豪侠好讲义气，忧人之忧，乐人之乐，好人坏人都合得来，父亲死了，几个郡的人都来吊唁，我爱他敬重他，但不愿你们向他学习。学习龙伯高不到家，还是一个谨慎勤勉的人，所谓雕刻鸿鹄不成可以像一只鹜哩。学习杜季良不到家，就堕落成为天下的轻薄儿，所谓画虎不成反像犬了。到现在为止杜季良还不可知，郡里的将领们一下车就切齿恨他，州郡都说他，我常为他寒心，所以我不愿子孙们学他。”杜季良名保，京兆人，当时是越骑司马。杜季良仇人上书，状告他“行为轻薄，乱群惑众，伏波将军从万里外写信回来以他训诫兄子，而梁松、窦固与之交往，将煽动轻佻虚伪，败乱我中华。”书奏，帝召梁松、窦固而责让，以状纸和马援诫书给他们看，梁松、窦固叩头流血，而得以不加罪。诏令免除杜季良官职。龙伯高名述，也是京兆人，为山都县长，因此提升为零陵太守。起初，马援在交阝止，常吃薏米，因薏米能除瘴气，久服能轻身省欲。